ExCell耗材如標(biāo)注無(wú)菌即是無(wú)菌的。如沒有注明,則未經(jīng)過(guò)滅菌處理
利用熒光染料結(jié)合雙鏈后發(fā)光的特性,實(shí)時(shí)檢測(cè)目的基因擴(kuò)增情況;通過(guò)對(duì)熒光強(qiáng)度的監(jiān)測(cè),得到實(shí)驗(yàn)樣品中被擴(kuò)增DNA片段的分子數(shù);或以內(nèi)參基因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn),比較某一基因數(shù)量變化或某幾個(gè)基因間的數(shù)量變化
樣本類型:RNA反轉(zhuǎn)得到的cDNA
細(xì)胞培養(yǎng)物、細(xì)胞裂解物:常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)定期檢測(cè),細(xì)胞凍存保種檢測(cè),病毒包裝檢測(cè)等; 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分泌物; 動(dòng)物血清等
原理:PCR法檢測(cè)有無(wú)支原體污染
支原體(直徑0.2-0.8微米)污染可能來(lái)自培養(yǎng)基,血清或?qū)嶒?yàn)操作者,會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)率,細(xì)胞形態(tài),基因表達(dá),細(xì)胞代謝和細(xì)胞活力,影響MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果和影響基因表達(dá)。支原體感染不易察覺,因此對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞定期進(jìn)行支原體檢測(cè)非常重要。一般來(lái)說(shuō)每1至3個(gè)月就應(yīng)進(jìn)行一次支原體檢測(cè)。
操作極其簡(jiǎn)單,整個(gè)操作流程只需3次離心,整個(gè)操作時(shí)間不超過(guò)一個(gè)小時(shí);濃縮效率極高:15cm培養(yǎng)板能夠獲得1 x106~1x107?ifu的病毒;無(wú)任何毒害作用:不會(huì)積累細(xì)胞殘片,避免了毒性和免疫反應(yīng)無(wú)需超速離心機(jī):降低了昂貴的機(jī)器成本適合大體積濃縮:很好的解決了超速離心方法的容量限制冷凍保護(hù):經(jīng)得起反復(fù)凍融
基于聚合物沉降法,針對(duì)慢病毒的特性(粒徑,等電點(diǎn)等)配制而成的最優(yōu)濃縮體系。將其與含有病毒的細(xì)胞上清混勻(1V:4V),4°C 過(guò)夜,1500×g離心30min收集病毒