支原體(mycoplasma):又稱霉形體,為目前發(fā)現的最小的最簡單的原核生物,估計有15%~35%的細胞被支原體污染。支原體污染會對細胞造成多方面的影響,包括代謝、免疫或生化特性、生長狀況、以及細胞存活等多方面的改變,影響實驗結果的穩(wěn)定性、可靠性和準確性;支原體難以檢測,同時也很難消除,其能輕易地通過0.22μm標準濾膜,同時也能拮抗絕大多數的抗生素,給細胞培養(yǎng)造成巨大損失。因此細胞都需要定期(如每2~3個月)進行支原體污染的檢測。許多方法可用于檢測支原體,包括肉湯或瓊脂培養(yǎng),直接或間接的熒光染色、ELISA、直接或間接的PCR法等,其中,直接PCR法靈敏度高。 為保證PCR結果的準確性,要預防非特異性PCR擴增和污染,常用的措施是采用熱啟動Taq酶和UDG (尿嘧啶-DNA 糖基化酶)。 化學修飾Taq酶活性中心被封閉,使得該酶在低溫或常溫沒有活性,因此在加樣至PCR擴增前,不會產生由于引物錯誤配對而形成的非特異性擴增。高溫(如95℃)條件下,化學修飾基團會水解脫落,釋放全部酶活性,從而實現Taq酶的熱啟動。最大程度降低非特異擴增和引物二聚體的形成,提高擴增靈敏度和特異性。 UDG (尿嘧啶-DNA 糖基化酶)能選擇性水解斷裂含有dU的單鏈或雙鏈 DNA中的尿嘧啶糖苷鍵,形成有缺失堿基的DNA鏈,在堿性條件及高溫下會進一步水解斷裂,從而被消除。本產品選擇UDG酶,最佳活性溫度為50℃,95℃滅活。 本產品含有化學修飾熱啟動酶的2×PCR mix,配以dUTP和UDG酶,可最大程度降低非特異擴增和引物二聚體的形成,有效防止PCR產物的交叉污染。同時在PCR管中預先加入上樣Loading Dye成份,使PCR前加樣處理及后續(xù)電泳上樣變的更方便,以達到準確檢測支原體污染,重復性好,可信度高。
Components MB000-1591 MB000-1592 8-cap strips with Loading Dye 6 12 Cell lysis buffer 5 ML 5 ML×2 Control template 50μL 50μL 2×EasyHotStart UDG PCR Master Mix 0.75 ML 1.5 ML Sterial ddH2O 1.5 ML 1.5 ML 保存條件:-20℃。 有效期:一年。 運輸條件:干冰運輸。
本試劑盒能檢測支原體種類包括 M. Hyorhinis, M. Arginini, M.Orale, M. Fermentans, A.laidlawii等常見支原體,這5種支原體代表了98%以上的細胞支原體污染。同時還能檢測Mycoplasma, Acholeplasma, Ureaplasma, Spiroplasma等種屬。
Q:OptiVitro? 無血清細胞凍存液 UC04(UC000-N056) A:無血清細胞凍存液UC04,是一款普遍適用于多種哺乳動物細胞低溫冷凍保存的即用型細胞凍存 液,經驗證本品適用于外周血單核細胞(PBMC)、T 細胞、NK 細胞、間充質干細胞(MSC)等多種類 型細胞的凍存。本品無血清,無蛋白,無異源體,成分簡單、明確,能夠保持多種細胞的復蘇活率可達 到 90%以上。 Q:OptiVitro?無蛋白,CD細胞凍存液(UC000-N011) A:OptiVitro 無蛋白,CD細胞凍存液(Protein-free, Chemical Defined Cell Cryopreservation Medium), 是一款普遍適用于多種哺乳動物細胞低溫冷凍保存的即用型細胞凍存液,經驗證本品適用于人間充質干 細胞(hMSC)、中國倉鼠卵巢細胞(CHO)、外周血單核細胞(PBMC)、人胚腎細胞(HEK293)、 非洲綠猴腎細胞(Vero)等類型細胞的凍存。本品化學成分明確,不含有任何蛋白成分,可排除血清或 蛋白潛在的病原體或免疫反應風險,使用更安全,并能夠保持多種細胞的復蘇活率在 90%以上。 Q:OptiVitro? 無血清細胞凍存液(VUC00-N011) A:OptiVitro?無血清細胞凍存液(Serum-free Cell Cryopreservation Medium),是一款適用于多種哺乳動物 細胞低溫冷凍保存的即用型細胞凍存液。經驗證本品適用于人間充質干細胞(hMSC)、中國倉鼠卵巢細胞 (CHO)、外周血單核細胞(PBMC)、人胚腎細胞(HEK293)、非洲綠猴腎細胞(Vero)等類型細胞的凍存。 本品無須進行額外配制,使用簡單,細胞凍存后復蘇的回收率和存活率高,可完美替代傳統(tǒng)的含血清凍存液。