產(chǎn)品概述
白介素 4(IL-4)是一種多功能細(xì)胞因子,主要是由激活的 T 淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞與堿性粒細(xì)胞表達(dá)。 IL-4對多種細(xì)胞有多種不同的調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)功能。 IL-4 是抗體亞型轉(zhuǎn)換重要的調(diào)節(jié)者,包括在 B 淋巴細(xì)胞上誘導(dǎo) IgE表達(dá)。它是 T 輔助前體細(xì)胞向 Th2 細(xì)胞分化的重要調(diào)節(jié)者,而后者是參與體液免疫與抗體生成。另外, IL-4 被指出參與體內(nèi)與體外的抗腫瘤活性。
人 IL-4 的 cDNA 編碼 153 個氨基酸組成的前體蛋白質(zhì),其中包含 24 個氨基酸組成的信號肽,當(dāng)信號肽被剪切后就形成了成熟的 IL-4 分子。在氨基酸水平,成熟的人 IL-4 與小鼠 IL-4 有50%的序列同源性,兩種分子沒有交叉反應(yīng)性。人 IL-4 與人 IL-13 也有 30%的氨基酸序列同源性,它們的生物學(xué)活力有一定交叉重疊。 IL-4 基因定位在染色體 5q 位點,與 IL-3、 IL-5、 IL-13 以及 GM-CSF 等基因在染色體上的位點非常接近。
產(chǎn)品原理
本實驗采用雙抗體夾心ELISA法??谷薎L-4單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-4會與單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入生物素化的抗人IL-4抗體,生物素化抗人IL-4抗體與酶標(biāo)板上結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品或樣本中的IL-4結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素,親合素與生物素特異性結(jié)合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應(yīng)孔中有IL-4,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑變藍(lán),加終止液變黃。在450nm處測OD值,IL-4濃度與OD450值之間呈正相關(guān),可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-4濃度。
產(chǎn)品性能
1. 靈敏度:最小可測人IL-4達(dá)2pg/ml 。
2. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%。
產(chǎn)品組分及儲存條件
名稱
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96 Tests
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48 Tests
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保存條件
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1. 抗體包被板條 (Microwell Plate)
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8×12
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8×6
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2-8℃
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2.標(biāo)準(zhǔn)品 (Standard)
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2 支(凍干)
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1 支(凍干)
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2-8℃
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3.濃縮生物素化抗體 100× (Biotin-Conjugate)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃
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4.濃縮酶結(jié)合物 100× (Streptavidin-HRP)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃(避光)
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5.試劑稀釋液 (Assay Diluent)
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2 瓶(25ml/瓶)
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1 瓶(25ml/瓶)
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2-8℃
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6.濃縮洗滌液 20× (Wash Buffer Concentrate)
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1 瓶 (30ml/瓶)
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1 瓶(30ml/瓶)
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2-8℃
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7.顯色劑 (Substrate Solution)
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1 瓶(12ml/瓶 )
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1 瓶(6ml/瓶)
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2-8℃(避光)
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8.終止液 (Stop Solution)
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1 瓶(12ml/瓶)
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1 瓶(12ml/瓶)
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2-8℃
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9.封板膠紙
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3 張
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2 張
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10.說明書
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1 份
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1 份
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試驗所需自備儀器和試劑:
1. 酶標(biāo)儀(450nm檢測波長濾光片,570nm或630nm校正波長濾光片)。
2. 高精度加液器及一次性吸頭:0.5-10μl,2-20μl,20-200μl,200-1000μl。
3. 37℃恒溫箱、蒸餾水或去離子水、坐標(biāo)紙。
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