產(chǎn)品概述
白細胞介素12(IL-12)和白細胞介素23(IL-23)是分泌型的異二聚體糖蛋白,其屬于IL-12細胞因子家族。這兩種細胞因子擁有相同的p40亞基,他們以二硫鍵分別和IL-12上的p35亞基、IL-23上的p19亞基相連。P40除了作為IL-12和IL-23的組成成分外,游離的P40二聚體和單體也是存在的。哺乳動物中表達p40的細胞包括巨噬細胞、樹突細胞、單核細胞、漢斯細胞、中性粒細胞、角質形成細胞、漿細胞樣樹突狀細胞和小膠質細胞。在共同表達p40和表達具有特異性p35亞基的IL-12細胞中,游離p40的量比異源二聚體IL-12的量高達10-1000倍。IL-12和IL-23是重要的免疫調節(jié)分子,在促進細胞介導的免疫中他們具有重疊但是又不同的生物學功能。
產(chǎn)品原理
本實驗采用雙抗體夾心ELISA法。抗小鼠IL-12p40單抗包被于酶標板上,標本和標準品中的IL-12p40會與單抗結合形成免疫復合物,游離的成分被洗去;加入生物素化的抗小鼠IL-12p40抗體,生物素化抗小鼠IL-12p40抗體與酶標板上結合的標準品或樣本中的小鼠IL-12p40結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化物酶標記的親合素,親合素與生物素特異性結合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應孔中有IL-12p40,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑變藍,加終止液變黃。在450nm處測OD值,IL-12p40濃度與OD450值之間呈正相關,可通過繪制標準曲線求出標本中IL-12p40濃度。