產(chǎn)品概述

轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）是能夠促進(jìn)培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為具有腫瘤表型的細(xì)胞的一種蛋白因子，后來人們發(fā)現(xiàn)與其腫瘤轉(zhuǎn)化作用相比，它更起著腫瘤抑制劑的作用，而且它是TGF-α 和TGF-β兩種蛋白質(zhì)的混合物。這兩個蛋白質(zhì)屬于一個超家族成員，包括TGF-β1到TGF-β5骨形成蛋白質(zhì)、激活素和抑制素。人類的TGF-β1是一個25kDa通過二硫鍵連接在一起的沒有糖基化修飾的同源二聚體。在所有哺乳動物中幾乎有100%的序列保守性。TGF-β1生物學(xué)活性的發(fā)揮需要TGF-β1從潛態(tài)復(fù)合物中釋放出來。在體外下，可以通過分裂LAP得以實(shí)現(xiàn)（例如酸化作用）。從潛態(tài)復(fù)合物中釋放TGF存在三種最基本的活性：TGF-β1作為抑制因子調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖；TGF-β1通過促進(jìn)合成和抑制降解來提高細(xì)胞外基質(zhì)的沉積；TGF-β1通過多種機(jī)制起到免疫抑制的作用。TGF-β對特定細(xì)胞的特定作用依賴于細(xì)胞所處的環(huán)境。

產(chǎn)品原理

本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法?？故骉GF－β1單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的TGF－β1會與單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去；加入生物素化的抗鼠TGF－β1抗體，生物素化抗鼠TGF－β1抗體與酶標(biāo)板結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品或樣本中的鼠TGF－β1結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去；加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素，親合素與生物素特異性結(jié)合，游離的成分被洗去。加入顯色底物（顯色劑），若反應(yīng)孔中有TGF－β1，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑變藍(lán)，加終止液變黃。在450nm處測OD值，TGF－β1濃度與OD₄₅₀值之間呈正相關(guān)，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中TGF－β1濃度。

產(chǎn)品性能

1. 靈敏度：最小可測小鼠TGF－β1達(dá)15pg/ml。

2.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%。

產(chǎn)品組分及儲存條件

試驗(yàn)所需自備儀器和試劑:

1. 酶標(biāo)儀(450nm檢測波長濾光片，570nm或630nm校正波長濾光片)。

2. 高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10μl，2-20μl，20-200μl，200-1000μl。

3. 37℃恒溫箱、蒸餾水或去離子水、坐標(biāo)紙。

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