產(chǎn)品概述
小鼠IL-5也被稱做T細(xì)胞替代因子,B細(xì)胞生長(zhǎng)因子II,嗜酸性粒細(xì)胞分化因子和嗜酸性粒細(xì)胞集落刺激因子,主要是由T細(xì)胞產(chǎn)生的一種多效性細(xì)胞因子。天然的小鼠IL-5是通過(guò)二硫鍵連接的同型二聚體糖蛋白,具有由N和O組成的碳水化合物鏈,其分子量為40~45KD。小鼠IL-5 cDNA編碼133個(gè)氨基酸殘基的前體蛋白,包含一個(gè)疏水信號(hào)蛋白其裂解后產(chǎn)生由113個(gè)氨基酸組成的成熟蛋白。成熟人IL-5與小鼠IL-5在氨基酸水平具有70%的同源性,小鼠和人的IL-5在人的細(xì)胞系具有相同的活性,但人的IL-5在小鼠細(xì)胞系表現(xiàn)的活性要遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于小鼠IL-5的活性。
產(chǎn)品原理
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法??剐∈驣L-5單抗包被于酶標(biāo)板上,同時(shí)加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品和生物素化的抗小鼠IL-5抗體,標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-5會(huì)與加入于孔中的生物素化的抗小鼠IL-5抗體及包被于酶標(biāo)板上的單抗結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親合素,親合素與生物素特異性結(jié)合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應(yīng)孔中有IL-5,辣根過(guò)氧化物酶會(huì)使無(wú)色的顯色劑變藍(lán),加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值,IL-5濃度與OD450值之間呈正相關(guān),可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-5濃度。