產(chǎn)品概述
巨噬細胞遷移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor MIF)最初在延遲型超敏反應中被識別,因其在該反應中抑制巨噬細胞的遷移。它在先天免疫反應如炎癥、自身免疫、腫瘤紊亂的病理生理學中扮演著非常重要的調(diào)節(jié)角色。人的MIF基因編碼115個氨基酸,是分子量為12.5 kDa的分泌型蛋白。晶體學的研究表明,MIF蛋白以同源三聚體的形式存在,也有報道認為它可以向二聚體或單體的形式一樣存在。盡管MIF與其他已知的細胞因子沒有同源性,但它與幾種細菌酶具有結(jié)構(gòu)同源性。MIF具有內(nèi)在的催化活性,已被證明起著異構(gòu)酶和氧化還原酶的作用,盡管它作為酶的生理學重要性仍然不清楚。 MIF在多種免疫系統(tǒng)的細胞中表達,包括T細胞,單核細胞/巨噬細胞,B細胞,嗜中性粒細胞,嗜酸性粒細胞,肥大細胞和嗜堿細胞。它也在幾種非免疫系統(tǒng)細胞和組織中表達,包括肺、皮膚、胃腸道的上皮組織,內(nèi)分泌組織如腎上腺和腦下垂體。
產(chǎn)品原理
本實驗采用雙抗體夾心ELISA法??谷薓IF單抗包被于酶標板上,標本和標準品中的MIF會與單抗結(jié)合形成免疫復合物,游離的成分被洗去;加入生物素化的抗人MIF抗體,生物素化抗人MIF抗體與酶標板上結(jié)合的標準品或樣本中的MIF結(jié)合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化物酶標記的親合素,親合素與生物素特異性結(jié)合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應孔中有MIF,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑變藍,加終止液變黃。在450nm處測OD值,MIF濃度與OD450值之間呈正相關(guān),可通過繪制標準曲線求出標本中MIF濃度。
產(chǎn)品性能
1. 靈敏度:最小可測人MIF達30pg/ml 。
2. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%。
產(chǎn)品組分及儲存條件
名稱
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96 Tests
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48 Tests
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保存條件
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1. 抗體包被板條 (Microwell Plate)
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8×12
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8×6
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2-8℃
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2.標準品 (Standard)
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2 支(凍干)
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1 支(凍干)
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2-8℃
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3.濃縮生物素化抗體 100× (Biotin-Conjugate)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃
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4.濃縮酶結(jié)合物 100× (Streptavidin-HRP)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃(避光)
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5.試劑稀釋液 (Assay Diluent)
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2 瓶(25ml/瓶)
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1 瓶(25ml/瓶)
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2-8℃
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6.濃縮洗滌液 20× (Wash Buffer Concentrate)
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1 瓶 (30ml/瓶)
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1 瓶(30ml/瓶)
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2-8℃
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7.顯色劑 (Substrate Solution)
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1 瓶(12ml/瓶 )
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1 瓶(6ml/瓶)
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2-8℃(避光)
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8.終止液 (Stop Solution)
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1 瓶(12ml/瓶)
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1 瓶(12ml/瓶)
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2-8℃
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9.封板膠紙
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3 張
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2 張
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10.說明書
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1 份
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1 份
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試驗所需自備儀器和試劑:
1. 酶標儀(450nm檢測波長濾光片,570nm或630nm校正波長濾光片)。
2. 高精度加液器及一次性吸頭:0.5-10μl,2-20μl,20-200μl,200-1000μl。
3. 37℃恒溫箱、蒸餾水或去離子水、坐標紙。
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