產(chǎn)品概述
白細(xì)胞介素7(早期也稱為淋巴細(xì)胞生成素-1或前B細(xì)胞生長(zhǎng)因子)最初是以基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的一種生長(zhǎng)因子形式被發(fā)現(xiàn)。小鼠IL-7的cDNA是通過在基質(zhì)細(xì)胞系上表達(dá)克隆而分離得到,隨后以該cDNA作為探針從肝腺癌細(xì)胞系上克隆出人IL-7的cDNA。人和小鼠的IL-7的cDNA編碼帶有25個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)肽的前體蛋白,該信號(hào)肽切除后形成包含必需二硫鍵和多個(gè)N-糖基化位點(diǎn)的成熟蛋白。人和小鼠成熟形式的IL-7分別含有152和129個(gè)氨基酸。相對(duì)于小鼠,人的IL-7更大是因?yàn)橛羞B續(xù)的19個(gè)氨基酸殘基的伸展,而小鼠的IL-7是沒有的。在氨基酸序列上,人和小鼠的IL-7具有近60%的同源性。人的IL-7并不表現(xiàn)種屬特異性, 在人和小鼠細(xì)胞上具有相同的活性。盡管小鼠的IL-7在人的T細(xì)胞上有活性,但有報(bào)道表明其在人的前B細(xì)胞上是沒有活性的。
產(chǎn)品原理
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法。抗人IL-7單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-7會(huì)與單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入生物素化的抗人IL-7抗體,生物素化抗人IL-7抗體與酶標(biāo)板上結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品或樣本中的IL-7結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素,親合素與生物素特異性結(jié)合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應(yīng)孔中有IL-7,辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑變藍(lán),加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值,IL-1β濃度與OD450值之間呈正相關(guān),可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-7濃度。